弧菌顯色培養(yǎng)基使用說明書

　　(Chromogenic Vibrio Agar)

　　【包裝規(guī)格】

　　環(huán)凱貨號 CRM008(干粉);CP0570(即用型平板)

　　包裝形式 71.3g/瓶;20套(φ9cm) /盒

　　【產品用途】

　　弧菌顯色培養(yǎng)基用于水產品及食物中毒樣品中弧菌特別是副溶血性弧菌的分離和鑒定。

　　【檢驗原理】

　　蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發(fā)酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非弧菌細菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;混合色素與副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌所對應的酶發(fā)生特異性反應，水解底物，釋放出顯色基團，在淡黃色平板上產生品紅色菌落(副溶血性弧菌)和綠-藍綠色的菌落(霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌)。

　　【配方成分】

　　弧菌顯色培養(yǎng)基配方(每升) 含量：

　　蛋白胨 18.8g

　　酵母膏粉 5.0g

　　氯化鈉 10.0g

　　蔗糖 20.0g

　　抑菌劑 1.5g

　　瓊脂 13.0g

　　混合色素 3.0g

　　最終pH 9.0±0.2

　　【使用方法】

　　1、取瓶內弧菌顯色培養(yǎng)基干粉71.3克，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至完全溶解，不需高壓滅菌，冷至約50℃，傾注滅菌平皿。

　　2、以無菌操作取檢樣25 g(mL)，加入3%氯化鈉堿性蛋白胨水225 mL，用旋轉刀片式均質器以8 000 r/min均質1 min，或拍擊式均質器拍擊2 min，或用Pulsifier脈沖式樣品處理器均質30秒，制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質器，則將樣品放入無菌乳缽中磨碎，然后放在500 mL的滅菌容器內，加225 mL3%氯化鈉堿性蛋白胨水，并充分振蕩。

　　3、增菌：將上述1:10稀釋液于36 ±1 ℃培養(yǎng)8～18h。

　　4、分離：在增菌液中用接種環(huán)取一環(huán)，于弧菌顯色平板上劃線分離，于36 ±1 ℃培養(yǎng)18～24 h。

　　5、通過驗證試驗進一步確認假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革蘭氏染色、生化鑒定等。進一步的試驗。

　　注：如產品類型為干粉，按上述1-5進行操作;若為即用型平板，按2-5進行操作即可。

　　【質量控制】

　　【儲存條件及保質期】

　　即用型平板： 2~8℃，避光保存，貯存期三個月。

　　脫水干粉培養(yǎng)基：旋緊瓶蓋，2~8℃密封干燥保存，貯存期二年。

　　【注意事項】

　　1. 稱量時注意粉塵，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。

　　2. 干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋，避免吸潮結塊。

　　3. 自制平板時需注意培養(yǎng)基的厚度，厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降，開裂;因此，一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基，平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。

　　4. 即用型成品平板應該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水，屬于正常現(xiàn)象。使用前應平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預干燥。

　　5. 質檢報告可以登錄環(huán)凱網站http://www.huankai.com， 打開“客服中心”頁面，輸入產品批號下載。

　　【廢物處理】

　　檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。

　　【執(zhí)行標準】

　　Q/HKSJ 03-2011 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司企業(yè)標準 普通微生物培養(yǎng)基

　　【說明版本】

　　2013年1月14日

　　【參考文獻】

　　1.GB/T4789.7-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 副溶血性弧菌檢驗

　　2.SN0173-2010 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 出口食品中副溶血性弧菌檢驗

　　3.SN1022-2010中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 出口食品中霍亂弧菌檢驗