023090 尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)

　　(Urea Agar Base)

　　用 途：

　　尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn) (GB4789.4-2010，《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版，SN0170-92和GB13091-91，ISO標(biāo)準(zhǔn))。

　　原 理：

　　蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀是緩沖劑;具有尿素酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的尿素，產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)呈堿性，酚紅指示劑在pH6.8時(shí)呈黃色，pH8.1呈粉紅色;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

　　培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨 1g

　　氯化鈉 5g

　　葡萄糖 1g

　　磷酸二氫鉀 2g

　　酚紅 0.012g

　　瓊脂 15g

　　最終pH7.2±0.2

　　使用方法：

　　1、稱取尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)24g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，待冷卻至50—55℃，每200mL培養(yǎng)基加入經(jīng)過(guò)濾除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL，尿素的最終濃度為2%。分裝無(wú)菌試管，制成斜面。

　　2、挑取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物，濃密地涂布在尿素瓊脂斜面上，置36±1℃培養(yǎng)24h。

　　3、于2—4h及24h各觀察一次結(jié)果。培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色時(shí)為陽(yáng)性反應(yīng)，顏色不變者為陰性反應(yīng)。如為陰性可繼續(xù)培養(yǎng)觀察至4d。

　　質(zhì)量控制：

　　質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h結(jié)果如下 ：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規(guī) 格：250g

　　參考文獻(xiàn)：

　　1.GB/T4789.4-2003 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)

　　2.GB/T4789.28-2003中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 染色法，培養(yǎng)基和試劑

　　3.SN0170-92 中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 出口食品中沙門氏菌屬(包括亞利桑那菌)檢驗(yàn)方法

　　4.GB/T4789.4-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)

　　5.GB 4789.4-2010 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)

　　6.GB 13091-91 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飼料中沙門氏菌的檢驗(yàn)方法

　　7.《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版，附錄XI J 微生物限度檢查。

　　8.ISO 6579：2002 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of Salmonella spp.