Bolton肉湯(含羊血和抗生素)

　　Bolton broth

　　用 途：

　　Bolton肉湯基礎(chǔ)用于空腸彎曲菌選擇性增菌培養(yǎng)。(GB4789.9-2008)

　　原 理：

　　乳白蛋白水解物、動(dòng)物組織酶解物提供碳、氮源;酵母浸膏提供各種維生素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;丙酮酸鈉和偏亞硫酸氫鈉能中和培養(yǎng)基的有毒物質(zhì)，也能增強(qiáng)培養(yǎng)基的空氣耐受力;a-酮戊二酸提供生長因子，促進(jìn)空腸彎曲菌的生長;碳酸鈉提供空腸彎曲菌最有利的酸堿環(huán)境;頭孢派酮和多粘菌素B抑制革蘭氏陰性菌;萬古霉素和三甲氧芐胺嘧啶抑制革蘭氏陽性菌;兩性霉素B抑制酵母和真菌的生長。

　　培養(yǎng)基配方(每升)：

　　1基礎(chǔ)配方

　　動(dòng)物組織酶解物 10g

　　乳白蛋白水解物 5g

　　酵母浸膏 5g

　　氯化鈉 5g

　　丙酮酸鈉 0.5g

　　偏亞硫酸氫鈉 0.5g

　　碳酸鈉 0.6g

　　a-酮戊二酸 1g

　　最終pH 7.2±0.2

　　2抗生素凍干配套試劑

　　頭孢派酮 0.02g

　　萬古霉素 0.02g

　　三甲氧芐胺嘧啶乳酸鹽 0.02g

　　兩性霉素B 0.01g

　　多粘菌素B 0.01g

　　3 完全培養(yǎng)基

　　基礎(chǔ)培養(yǎng)基 100ml

　　無菌裂解脫纖維綿羊或馬血 5ml

　　抗生素凍干配套試劑 1支

　　使用方法：

　　1. 稱取Bolton肉湯基礎(chǔ)27.6g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min。

　　2. 在冷卻至45℃左右的bolton肉湯，在無菌條件下，每100ml培養(yǎng)基加入經(jīng)反復(fù)凍融的無菌脫纖維羊或馬血5ml和1支配套試劑SR0340。

　　3. 樣品處理參考標(biāo)準(zhǔn)。

　　4. 預(yù)增菌與增菌：

　　在微需氧條件下，以100r/min的振蕩速度，36±1℃培養(yǎng)4h。42℃±1℃繼續(xù)培養(yǎng)48±2h。

　　質(zhì)量控制：

　　下列質(zhì)控菌株接種后于42℃±1℃微需氧培養(yǎng)48±2h結(jié)果如下：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規(guī) 格：250g

　　參考文獻(xiàn)：

　　1. GB/T 4789.9-2008 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 空腸彎曲桿菌檢驗(yàn)

　　2. 美國FDA Bacteriological Analytical Manual Chapter 7 Campylobacter