022040 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基

　　(Lactose Bile Ferment Broth)

　　用 途：

　　乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基用于多管發(fā)酵法測(cè)定食品、藥品、純凈水、礦泉水和一次性使用衛(wèi)生用品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌(GB/T 8538-2008和GB15979-2002，中華人民共和國(guó)藥典2010年版)。

　　原 理：

　　胨提供碳源和氮源滿足細(xì)菌生長(zhǎng)的需求;牛膽鹽可抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng);乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類(lèi);溴甲酚紫是pH指示劑，酸性呈黃色，堿性呈紫色。

　　配方(每升乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基)：

　　胨 20.0g

　　牛膽鹽 5.0g

　　乳糖 10.0g

　　溴甲酚紫 0.01g

　　最終pH 7.4±0.2

　　使用方法：

　　1、稱(chēng)取乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基35克(單料)或70克(雙料)加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝于帶有小倒管的試管中，培養(yǎng)基每管10mL，115℃高壓滅菌15min。

　　2、樣品的處理及稀釋。略。

　　3、(1)食品：取1mL稀釋液，加入到含有10mL乳糖膽鹽培養(yǎng)基的試管中，根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選取三個(gè)合適的稀釋度每個(gè)稀釋度接種三管。將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，接種量在1mL以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管，1mL及1mL以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。

　　(2) 一次性使用衛(wèi)生用品：取樣液5mL接種50mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。

　　(3)藥品：取不少于10ml的乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)管3支，分別加入1：10的供試液1ml;1：100的供試液1ml;1：1000的供試液1ml，另取1支乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管加入稀釋液1ml作為陰性對(duì)照管。

　　4、將試管放入到培養(yǎng)箱中36±1℃培養(yǎng)24h;藥品放入30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24h。

　　5、觀察結(jié)果。如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者，則要進(jìn)行分離、證實(shí)試驗(yàn)。

　　質(zhì)量控制：

　　配成的培養(yǎng)基呈紫色，質(zhì)控菌株接種后，于36±1℃培養(yǎng)24h或者30～35℃培養(yǎng)18～24h結(jié)果如下：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規(guī) 格：250g

　　參考文獻(xiàn)：

　　1. 《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版，附錄XI J 微生物限度檢查。

　　2. GB/T 4789 .3—2003 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) 大腸菌群檢驗(yàn)

　　3. GB15979-2002中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

　　4. GB/T 8538-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)